加入收藏
百奥莱博公司客服电话百奥莱博QQ百奥莱博QQ百奥莱博QQ
百奥莱博公司微信服务号

产品目录

M-MLV反转录酶(RNase H-)图片
产品货号:
BM0301
中文名称:
M-MLV反转录酶(RNase H-)
英文名称:
M-MLV RNase H- Reverse Transcriptase
产品规格:
10kU
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是通过基因修饰和重组技术克隆表达的RNase H活性缺失型莫洛尼氏鼠白血病毒(M-MLV)逆转录酶。经过基因工程改造,本酶的最适反应温度提升至42℃,延伸能力更强,可用于较长的cDNA合成。




37℃条件下,以Poly(A)-Oligo(dT)为模板/引物,在10min内,掺入1nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。


组分规格
M-MLV反转录酶(RNase H-,200U/μL)50μL
5×M-MLV First Strand Buffer500μL
100mM DTT100μL

保存:-20℃


  • 宿主原性DNA检测:无宿主DNA污染。
  • 核酸内切酶残留检测:将酶液与超螺旋质粒DNA在37℃温育4h,通过DNA电泳检测质粒无变化。
  • 核酸外切酶残留检测:将酶液与双链DNA底物在37℃温育16h,通过DNA电泳检测双链DNA底物无变化。



一、第一链cDNA合成
  • 于冰上配制如下反应体系:
    成分用量
    引物Oligo(dT)20
    或随机引物
    或基因特异性引物
    终浓度2.5μM
    终浓度2.5ng/μL
    终浓度0.25μM
    模板RNA50ng~1μg/20μL
    dNTP Mix (10mM Each)1μL
    Nuclease-Free Water至13μL
    • 推荐使用试剂盒提取的已去除基因组DNA污染的高质量RNA作为模板。
  • 将以上混合液在65℃温育5min,迅速取出置于冰上冷却1min;
  • 向反应混合液中继续加入:
    成分用量
    5×M-MLV First Strand Buffer4μL
    0.1M DTT1μL
    M-MLV反转录酶(RNase H-,200U/μL)1μL
    可选:RNase Inhibitor(40U/μL)1μL
  • 轻柔吸打混匀后,瞬离;
  • 若使用Oligo(dT)20或基因特异性引物,42℃温育30min;若使用随机引物,先25℃温育5min,之后42℃温育30min;
  • 反应结束后,85℃温育5min以终止反应;
  • 将获得的cDNA溶液置于冰上,用于后续实验。
    • cDNA溶液置于-20℃可保存半年;置于-80℃可长期储存。

相关搜索:M-MLV反转录酶(RNase H-)反转录酶逆转录酶M-MLVRTase第一链cDNA合成M-MLV RNase H- Reverse Transcriptase
首页 |  关于我们 |  联系我们 |  在线咨询 |  网站地图
北京百奥莱博科技有限公司 京ICP备14007103号-3